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ELISA實(shí)驗樣本處理的注意事項

點(diǎn)擊次數:2430   發(fā)布時(shí)間:2024/6/4 9:55:32

    ELISA試劑盒檢測的樣本是有多種類(lèi)型的,如血清、血漿、尿液、細胞培養上清或安排勻漿液等,不同類(lèi)型的檢測樣本前期的處理辦法是不一樣的。試驗樣本的處理可謂是ELISA試驗的關(guān)鍵過(guò)程,所以科研朋友一定要多加注意。下面就給大家詳細說(shuō)說(shuō)!


    一、均質(zhì)   

    ①安排樣本:肉、肝食品類(lèi)切細,用絞肉機重復絞碎,混合均勻。    

    ②水產(chǎn)樣本:去除樣品的非食用部分,食用部分切細,用均質(zhì)器均漿;質(zhì)料外表較臟時(shí),需適當用蒸餾水清洗。

    ③蛋類(lèi):鮮蛋去殼,蛋黃和蛋白充沛混勻。    

    ④水果、蔬菜類(lèi):先用水洗去泥沙,然后除去外表的水分,取食用部分。


    二、振動(dòng)提取    

    將提取溶劑參加到裝有樣品的具塞容器中,振動(dòng),使提取溶劑與容器內的樣品充沛觸摸以深入到樣本安排內部,提取待測組分。

    ①振動(dòng)辦法:振動(dòng)器上進(jìn)行上下、往復式振動(dòng)、手搖式上下振動(dòng)。    

    ②在安排樣本中參加有機溶劑之間提取時(shí),ELISA試劑盒應邊加邊振動(dòng),防止安排凝結成團,不利于提取。


    三、乳化現象

    在用有機溶劑提取過(guò)程中,假如呈現乳化現象,處理的辦法有:    

    ①用細頭輕輕的拌和,損壞乳化后,再重復離心。    

    ②再參加適量的提取劑,重新振動(dòng)。注意離心后要確保樣本的稀釋倍數不變。


    四、濃縮

    因為凈化過(guò)程中引進(jìn)的溶劑,可能會(huì )降低待測組分的濃度或者不適宜直接剖析,需要去除全部有機溶劑。即試劑盒前處理過(guò)程中把樣本在60℃氮氣下吹干,再用復溶液溶解枯燥殘留物。


    濃縮辦法:氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。    

    請注意:

    ①在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質(zhì)攪擾。    

    ②在吹樣本時(shí),針頭應在液面上空,防止與樣本觸摸,防止發(fā)生交叉污染。    

    ③樣本吹干后應立即取下,防止吹的時(shí)刻過(guò)長(cháng),影響zui終檢測結果。    

    ④不同的藥物,吹干后樣本的保質(zhì)期不同,ELISA試劑盒提倡待樣本回到室溫后立即復溶。


    五、凈化

    經(jīng)過(guò)提取的待測組分中一般含有一些會(huì )攪擾試劑盒中抗原抗體反響的雜質(zhì)或者是含有與待測物結構相似的雜質(zhì)。將待測組分與雜質(zhì)別離的過(guò)程,咱們稱(chēng)為試劑盒中樣本的凈化。在咱們現有的試劑盒前處理辦法中涉及到常見(jiàn)的凈化是:液液分配法。比方:用復溶液溶解枯燥殘留物之前先參加適量的正己烷,在參加正己烷和復溶液渦動(dòng)后假如呈現乳化現象,能夠60℃水浴加熱,至乳化現象消失或削弱后,加大離心轉速進(jìn)行離心。


原創(chuàng )作者:上海恒遠生物科技有限公司

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